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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱:

小鼠海綿體內(nèi)皮細(xì)胞

產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

小鼠海綿體內(nèi)皮細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:減數(shù)分裂缺陷蛋白1抗體 甘丙肽受體1抗體 跨膜TMIGD1蛋白抗體 小鼠肌源性干細(xì)胞 大鼠小腸血管內(nèi)皮細(xì)胞 DOHH2彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞 MM.1S人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞

產(chǎn)品型號(hào):

廠商性質(zhì):經(jīng)銷商

訪問量:650

更新時(shí)間:2025-04-09

產(chǎn)品特性Product characteristics

小鼠海綿體內(nèi)皮細(xì)胞

小鼠海綿體內(nèi)皮細(xì)胞

商品屬性:

組織來源

產(chǎn)品規(guī)格

細(xì)胞形態(tài)

貨號(hào)

海綿體組織

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

內(nèi)皮細(xì)胞樣

YS-01X7528

細(xì)胞簡(jiǎn)介:

小鼠海綿體內(nèi)皮分離自海綿體組織;陰莖海綿體是由海綿狀的小梁和腔隙構(gòu)成的血竇結(jié)構(gòu),它主要包括海綿體內(nèi)皮細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞和成纖維細(xì)胞3種細(xì)胞成分。其中平滑肌細(xì)胞和成纖維細(xì)胞鑲嵌于海綿體細(xì)胞外基質(zhì)的膠原中,而海綿體內(nèi)皮細(xì)胞則覆蓋于海綿體血竇的腔面,僅占海綿體組織的2.8%。在消化海綿體組織時(shí),膠原酶的作用主要是松解海綿體內(nèi)皮細(xì)胞與基膜的聯(lián)系,破壞海綿體內(nèi)皮細(xì)胞間的緊密連接。如果消化時(shí)間延長(zhǎng)或膠原酶濃度過大,平滑肌細(xì)胞和成纖維細(xì)胞也將被消化下來,從而影響海綿體內(nèi)皮細(xì)胞的純度。因此,比較篩選合適的膠原酶濃度和消化時(shí)間是成功分離海綿體內(nèi)皮細(xì)胞的關(guān)鍵。

方法簡(jiǎn)介:

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠海綿體內(nèi)皮采用混合酶消化法結(jié)合機(jī)械分離法、并用內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè):

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠海綿體內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

包被條件 PLL0.1mg/ml),明膠(0.1%

培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、PenicillinStreptomycin

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳2-3

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%

小鼠海綿體內(nèi)皮細(xì)胞

細(xì)胞傳代及凍存:

細(xì)胞傳代步驟細(xì)胞凍存步驟
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。

 ?、?消化培養(yǎng)法

 ?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

  對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

 ?、芷鞴倥囵B(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

小鼠海綿體內(nèi)皮細(xì)胞


公司正在出售的產(chǎn)品:

轉(zhuǎn)基因植物NOS基因核酸試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T

轉(zhuǎn)基因植物NOS基因核酸試劑盒   48T

轉(zhuǎn)基因植物PAT基因核酸試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T

轉(zhuǎn)基因植物PAT基因核酸試劑盒   48T

豬胰島素樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)ELISA 試劑盒

Human leinizing hormone releasing hormone (LHRH) ELISA Kit 人黃體生成素釋放激素(LHRH)試劑盒

Rabbitniicoxidesyhase,NOSELISAKit 兔合成酶(NOS)試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitforAP(HumanAprotinin)ELISAKit

血清樣品液相法去內(nèi)毒素試劑盒20

PorcineIerleukin12,IL-12/P40ELISAKit豬白介素12(IL-12/P40)試劑盒

20號(hào)染色體開放閱讀框202抗體

中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶ELANE抗體

NRP1重組食蟹猴 Neuropilin-1 / NRP1 蛋白  Protein

IL-23(Interleukin-23 0.5mgIL-23(Interleukin-23) 白介素-23抗原

GRK6重組人 GRK6 / GPRK6 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

BPHL Protein Human 重組人 BPHL 蛋白 (His 標(biāo)簽)

MCAM Protein Mouse 重組小鼠 CD146 / MCAM 蛋白 (His 標(biāo)簽)

IL-23(Interleukin-23 0.5mgIL-23(Interleukin-23) 白介素-23抗原

BPHL Protein Human 重組人 BPHL 蛋白 (His 標(biāo)簽)

NRP1重組食蟹猴 Neuropilin-1 / NRP1 蛋白  Protein

MCAM Protein Mouse 重組小鼠 CD146 / MCAM 蛋白 (His 標(biāo)簽)

GRK6重組人 GRK6 / GPRK6 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

小鼠海綿體內(nèi)皮細(xì)胞大鼠骨成型蛋白3(BMP-3)試劑盒 ,英文名: BMP-3 ELISA Kit

Rabbit ierleukin 1 beta (IL-1 beta) ELISA Kit 兔子白介素1β (IL-1β)試劑盒

3型脊髓灰質(zhì)病毒(PV-3)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMIS/AMH(HumanMullerianInhibitingSubstance/Ai-Mullerianhormone)ELISAKit人繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管激素

體液堿性0酸酶活性比色法定量試劑盒20

ELISAKitE2犬雌二醇

原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:

  一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;

  2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;

  3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

  4、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

  6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂?。?/p>

  7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;

  8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

  二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

  1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;

  2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;

  3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);

  4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長(zhǎng);

  5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

  6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行


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